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對于小鼠組織 DNA 提取而言,樣品前處理步驟至關(guān)重要,它直接影響著 DNA 的質(zhì)量與后續(xù)實驗結(jié)果。冷凍研磨儀憑借其獨(dú)特的低溫研磨優(yōu)勢,成為提升小鼠組織研磨效率與質(zhì)量的得力工具。小鼠5種組織部位總DNA不同提取方法的比較:用實驗室的冷凍研磨儀對小鼠的心、肝、脾、肺、腎進(jìn)行研磨。 分別采用SDS法和CTAB法提取基因組DNA。
實驗用儀器:
冷凍研磨儀 JXFSTPRP-CL
實驗步驟:
先做樣品前處理步驟 :
1、把解剖后的小鼠心、肝、脾、肺、腎等組織用 PBS磷酸緩沖液沖洗后放入2 mL的ep管中,加入3mm的氧化鋯珠;
2、預(yù)冷600秒開始研磨,使用參數(shù)為65Hz,進(jìn)行研磨;
3、研磨好的組織放入滅菌離心管中,方便后續(xù)DNA提取對照 ;
實驗結(jié)果:
樣品研磨前后效果圖
值得注意的是,在研磨過程中,由于肺組織的結(jié)構(gòu)較為特殊,細(xì)胞間質(zhì)豐富、質(zhì)地疏松,相較于其他組織,需要更久的研磨時間才能充分破碎細(xì)胞。因此,在操作時需時刻觀察研磨情況,及時調(diào)整時間,確保各組織均達(dá)到理想的破碎效果,使后續(xù) DNA 提取實驗?zāi)茼樌M(jìn)行,從而準(zhǔn)確比較不同提取方法對小鼠各組織 DNA 提取的效果。
通過冷凍研磨儀對小鼠多種組織進(jìn)行前處理,為 DNA 提取提供了高質(zhì)量的樣品基礎(chǔ),保障了實驗結(jié)果的可靠性與準(zhǔn)確性。這一技術(shù)的應(yīng)用,不僅提升了實驗效率,也為深入探究不同提取方法對小鼠組織 DNA 提取的影響提供了有力支持。期待后續(xù)實驗?zāi)芑诖?,進(jìn)一步挖掘不同提取方法的優(yōu)勢與特點,為生命科學(xué)研究提供更堅實的理論與實踐依據(jù)。
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